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栽培技术

食用菌菌种制作实用技术

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随着食用菌产业的蓬勃发展,菌种需要量随之增加,而现有菌种生产单位明显偏少,许多菇农不得不向外引种。长途购运菌种不仅花费大,成本高而且菌种因破瓶而 易引起杂菌污染,从而严重影响栽培食用菌的经济效益。菇农若能掌握菌种生产程序和制种技术,实行自行制种,逐步发展成制种专业户,也是一项很好的致富门 路。 菌种生产程序,通常分为母种、原种和栽培种3个层次,也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。其中母种的分离选育技术性强,要求精化;而原种和栽培种的制 作则比较简单。下面介绍各级菌种的制作技术。

一、母种的分离选育 母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。作为一般制种专业户,可以采用人工选择方式分离培育母种,具体步骤与操作方法如下。

1、采集种源 从野生成人工栽培群体中,选择有代表性的优良菇体作为种源。种菇的标准是:八成熟,朵形圆正、肉质肥厚,无病虫害。采集1–2朵符合上述标准的种菇编上号码,作为分离母种的材料。从栽培室采集的应标有原菌株代号。

2、培养基配制琼脂培养基又叫PDA培养基,常用配方为:马铃薯200–250克,琼脂15–20克,葡萄糖20–25克,清水1000毫升。也 可以加硫酸镁 1–1.5克,维生素B1微量,磷酸二氢钾2–3克。先将马铃薯洗净去皮,切成薄片,置于铝锅内加水煮沸30分钟,捞起后用4层纱布过滤,取汁。然后 将琼脂加入汁内,边加热边搅拌,让琼脂充分溶化;再将葡萄糖等加入,稍煮几分钟后,同样用4层纱布过滤,取其汁液。将汁液趁热装入玻璃试管内。装至管长的 1/5,管口用棉花塞紧,或将汁液装入玻璃三角瓶内,装量20毫升。然后置于高压锅内,在98–108千帕/厘米的压力下灭菌30分钟左右。灭菌后及时 取出,趁热将试管斜排于桌上,冷却后即成为固体斜面培养基。

3、母种分离方法有孢子弹射、组织分离和基内分离3种方法。①孢子弹射 法。将种菇表面消毒,吸干水分后,将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内,让菇体内的袍子自然散落在培养基上萌发菌丝。也可以剪取一小决菇体,贴附在试管 斜面培养基表面,让孢子散落在培养基上萌发菌丝,即能获得母种;③组织分离法。将消毒过的种菇,在接种箱内用手从菇柄处对半解开,或用刀片切开,使菇体形 成对开。在菌盖和菌柄交界处或菌褶处,用接种刀切取一小块菇体,然后纵切成5毫米x10毫米的小薄片,用接种针挑取一块薄片,接入斜面培养基的中央,每支 试管接种一小决薄片,待其萌发菌丝,即可得到母种;(3)基内分离法。选择已长菇的木段,削去树皮及表层木质部,用70%的酒精消毒后,锯成1厘米厚的薄 片,放入0.1%的升汞水中消毒1–2分钟,再用灭菌水洗去残液。然后再将小薄片劈成 0.5–1厘米宽的小条,接入斜面培养基中央,待长出菌丝后即得母种。也可以在已长菇的菌袋中,经消毒处理后,用接种针钩取袋内色泽纯、长势旺的菌丝 体,接种在试管斜面培养基中央,待萌发菌丝后,同样获得菌种。

4、适温培养通过上述不同方式将菌种分离接种于试管后,要及时将试管移 入已消毒的培养箱或培养室内培养,温度控制在25℃左右,使分离获得的孢子或菌丝在适温下发育。一般孢子弹射3–4天后孢子萌发成菌落,10天后菌丝长 满管;组织分离接种后2–3天,菌丝即萌发,并在培养基上蔓延生长;菇木分离接种后,7天菌丝即恢复生长。

5、选育提纯通过上述方 法得到的菌丝,不一定都是优质的,还需要选育提纯。因此,在菌丝萌发后,要认真观察,挑选色泽纯、健壮、长势正常、无间断的菌丝,在接种箱内连同培养基钩 取菌丝,接入另备的试管培养基上。在23–25℃的恒温条件下,培养7–10天,待菌丝长满管后,再进行观察,从中择优取用,即为“母代” 母种。

6、转管扩接 母代母种可以转管扩接成“子代”母种。采用同样的斜面培养基,每支可扩接30–50支子代母种。生产上供应的多为子代母种。它可以再次转管扩接。一般每支可扩接成20–25支子代母种,但转管次数不得超过5次。

7、出菇试验 分离选育的母种,还必须进行出菇试验。方法是:把母种接种于瓶或袋装的木屑培养基上,根据各种菇耳种性对温度的要求,进行适温培养,直至出菇才证实可用于生产。

二、原种繁殖培养 将母种接在瓶或袋的木屑培养基上,通过培养,即成原种。其技术要求如下。

1、原种木屑培养基配方杂木屑77.5%,麦麸20%,蔗糖1%,石膏粉1.2%,硫酸镁0.3%。pH值(灭菌前)6.5–7,含水量调至60%。 将上述原、辅料混合拌匀,装入750毫升的玻璃菌种瓶内,装料要求下松上紧。瓶口塞紧棉花,再用牛皮纸包住瓶颈与棉塞。然后置于高压灭菌锅内,在147千 帕/平方厘米压力下灭菌 2–2.5小时。也可进行常压灭菌,在100℃下保持10–11小时,达标后趁热取出,让其冷却。

2、接入菌种 待料温降至25℃以下时,在灭菌条件下,将试管种分割成若干决,通过酒精灯火焰迅速接入原种培养基上,每支母种可按4–6瓶原种。

3、发菌培养 接种后及时将玻璃菌种瓶移入25℃菌种培养室内进行培养。空间相对湿度控制在70℃以上,避免强光照射。原种培养时间一般菇类需要40–50天,草菇、银耳只需15–20天即可。

4、去杂选优 原种培育过程中,要每天进行观察,如发现有杂菌污染的,应立即淘汰。

三、栽培种扩大培育将原种再次扩接在同样的木屑培养基上,在适温条件下培养30–35天即为栽培种(又叫生产种),可用于生产栽培。栽培种可用750毫 升菌种专用瓶,由于使用量大,所以通常多采用聚丙烯菌种袋。袋的规格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等,可根据各种菇耳特 性和当地习惯选择使用。培养基灭菌采用常压灭菌灶灭菌,要求灭菌温度达100℃,保持8–10小时,达标后趁热卸袋冷却。待料温降至25℃以下时,在无 菌条件下接入选定品种的原种。每瓶原种可扩接成50–60瓶栽培种。菌种培育室要求干净,防强光,室温掌握在23–25℃,并经常检查,发现杂菌污染 应及时淘汰,不断选优去劣。当菌丝长满袋,尖端菌丝反转上爬1–3厘米时,为适龄的栽培种。

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